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公司新聞

生長激素(GH)ELISA試劑盒的原理及操作步驟

更新時間:2022-10-28 瀏覽次數(shù):788

  生長激素(GH)ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人生長激素(GH)的含量。
 
  生長激素(GH)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理:
 
  采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人GH單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的GH與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人GH,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,最后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,GH濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中GH濃度。
 
  生長激素(GH)ELISA試劑盒的操作步驟:
 
  1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 
  2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
 
  3、樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
 
  4、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 
  5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
 
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 
  7、每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

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