【膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)簡介】：是一種蛋白質(zhì)，由GDNF基因編碼。它于1991年被發(fā)現(xiàn)，是GDNF配體家族（GFL）的第一個成員。GDNF是一種小蛋白，能有效地促進多種類型的神經(jīng)元的生存。它還負責(zé)將精原細胞確定為初級精母細胞，即它被RET接收，并通過與SCF形成梯度，將精原細胞分成兩個細胞。GDNF的結(jié)構(gòu)與TGFβ2相似，它有兩個指狀結(jié)構(gòu)，與GFRα1受體相互作用。在原GDNF的分泌過程中發(fā)生的N-連接糖基化發(fā)生在其中一個指狀結(jié)構(gòu)的頂端。成熟的GDNF的C端在與Ret和GFRα1受體的結(jié)合中起著重要作用。

產(chǎn)品名稱：人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子檢測試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：96T/盒，可檢測90個樣；48T/盒，可檢測42個樣。

貯藏條件：2~8℃低溫保存

性狀：盒裝液體，有效期6個月

特異性：同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)

標(biāo)本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊液、心房水、胸腹水、組織等

種屬齊全：人、大小鼠、植物土壤、雞、犬、猴、兔、豚鼠、豬ELISA檢測試劑盒等種屬

研究域：炎癥研究、生物學(xué)、研究、新陳代謝、信號通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究

適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床

 人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子檢測試劑盒組成及試劑配備：（檢測范圍請參考說明書）

實驗所需自備試驗器材：

1.      酶標(biāo)儀（450nm）

2.      高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒溫箱

4.      蒸餾水或去離子水

操作流程如下：

【平衡試劑盒至常溫】：取出實驗過程中所需板條，剩余半條用自封袋密封放回4攝氏度。

【加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。在樣本孔先加樣本10μl再加稀釋液40μl，（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
【加酶】：標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔總每孔加入酶標(biāo)試劑100μl（辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體）空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫箱溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后甩去洗滌液，吸水紙上拍干。如此重復(fù)5次（也可用洗板機洗板）。

【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光孵育15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

洗板時應(yīng)該注意以下問題：

1）及時更換破損吸液針，避免破壞底板包被。

2） 需每天校正注液量及殘液量，洗滌后殘液量不得大于2ul。

3）注意調(diào)整洗液量，洗液量過多溢出，過少將達不到洗滌效果。

4）關(guān)機前使用蒸餾水沖洗管道，避免洗滌的結(jié)晶物堵塞管道。

5） 針對不同廠家酶標(biāo)注意調(diào)整吸液頭下降高度，避免沖洗針頭卡住酶標(biāo)板。

6）不同試劑盒的洗液嚴(yán)禁混合使用。

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