H2A組蛋白家族成員X（通?？s寫為H2AX）是由H2AFX基因編碼的一種組蛋白。一個重要的磷酸化形式是γH2AX（S139），它在雙鏈斷裂出現(xiàn)時形成。H2AX在絲安酸139上變得磷酸化，然后被稱為γH2AX，作為DNA雙鏈斷裂（DSB）的反應(yīng)。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中人磷酸化組蛋白(γH2AX)的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

檢測原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗原，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人磷酸化組蛋白γ-H2AX（γ-H2AX）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

人磷酸化組蛋白(γH2AX)科研ELISA試劑盒組成：（檢測范圍請參考說明書）

注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。

實驗需要但未提供的材料及耗材：

1、酶標(biāo)儀（建議儀器使用前提前預(yù)熱）

2、精密移液器、吸頭、加樣槽

3、蒸餾水或去離子水

4、洗瓶或者自動洗板機

5、37℃水浴鍋或恒溫箱

6、EP 管

7、無粉一次性乳膠手

人磷酸化組蛋白(γH2AX)科研ELISA試劑盒操作流程如下：

【平衡試劑盒至常溫】：取出實驗過程中所需板條，剩余半條用自封袋密封放回4攝氏度。

【加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。在樣本孔先加樣本10μl再加稀釋液40μl，（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
【加酶】：標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔總每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗原100μL空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫箱溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后甩去洗滌液，吸水紙上拍干。如此重復(fù)5次（也可用洗板機洗板）。

【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光孵育15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

我司供應(yīng)種屬種類齊全：人、大小鼠、豬、雞、犬、猴、牛羊、雞鴨、藥殘類、植物、羊、豚鼠等。質(zhì)量可靠、靈敏度高、效果穩(wěn)定、易保存。同時免費提供產(chǎn)品最新報價、實驗原理、產(chǎn)品用途及中英文說明書。上海軒澤康生物擁有自己的實驗室（上海）和技術(shù)團(tuán)隊，公司提供售前、售中、售后技術(shù)支持，為您解決實驗過程中遇到的問題。想要了解更多實驗代做服務(wù)，歡迎咨詢!

ELISA試劑盒常見問題解答：

1. 問：96T可以檢測多少個樣本？48T可以檢測多少個樣本？

軒澤康生物解答：96T ELISA試劑盒可檢測90個樣本，留6個孔做標(biāo)準(zhǔn)曲線；48T ELISA試劑盒可檢測42個樣本。

2. 問：能否使用自己的稀釋液或者緩沖液？

軒澤康生物解答：每個試劑盒中都含有按配方配置的與特異性樣品種屬相配套的稀釋液，以確保待檢測的樣品被正確稀釋。具體請參看說明書

3. 問：ELISA檢測試劑盒空白對照是什么意思？

軒澤康生物答：不加樣本，不加稀釋液，不加酶標(biāo)試劑。其他都可以加。

4. 問：我是按照實驗步驟進(jìn)行測定的但是沒有任何信號，這是為什么？

軒澤康生物答： 對于使用HRP底物的比色測定，終止液的加入會使底物變色。而說明書推薦的波長就是最適波長。通過輕拍酶標(biāo)板的邊緣充分混合孔內(nèi)試劑，加入終止液時顏色由藍(lán)變黃。如果加終止液之前孔內(nèi)試劑沒有混合，則底物顏色變綠。也可能加入試劑的順序錯誤。加入底物溶液以后不要清洗酶標(biāo)板，在連續(xù)稀釋時確定已經(jīng)加入標(biāo)準(zhǔn)品。如果底物系統(tǒng)中有兩個成份必須混合均勻。同時需確保酶標(biāo)儀的使用和操作正確。確定試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品都正確配置并按照說明滴加無誤。

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